- 全血及洗涤血小板的流式检测的标本制备有哪些注意事项?
- 版权:武汉天安医院 时间:2012-12-15 15:16 点击: 次
全血及洗涤血小板的流式检测的标本制备有哪些注意事项? (二)标本制备 可选择全血、洗涤血小板及富含血小板血浆( platelet-richplasma,PRP)作为标本来源。由于洗涤血小板和PRP在制备过程中易导致血小板活化或某些亚群的丢失,所以建议选用全血,血量要求少免费健康热线:400-6325-120
全血及洗涤血小板的流式检测的标本制备有哪些注意事项?
(二)标本制备
可选择全血、洗涤血小板及富含血小板血浆( platelet-richplasma,PRP)作为标本来源。由于洗涤血小板和PRP在制备过程中易导致血小板活化或某些亚群的丢失,所以建议选用全血,血量要求少,一般5μL即可,因而即使在新生儿疾病等标本难以获得的情况下,仍可满足检测要求。而且,全血中含有影响血小板活化的各种细胞成分,能够更加准确地反应血小板的活化状态以及血小板与其他血细胞的相互作用。
抽取静脉或动脉血,3.2%或3.8%的枸橼酸钠抗凝。亦可根据检测目的选用其他抗凝剂,如测定血小板功能,评价纤维蛋白原受体拮抗剂的疗效时宜选用胰蛋白酶、水蛭素等;而检测血小板活性时,不建议使用肝素和EDTA,因为肝素可以结合并活化血小板,EDTA会阻断纤维蛋白原与GP II b III a的结合,并解离GP II b III a复合物。
由于采血过程会引起血小板的活化,因而采血时应格外小心。压脉带不要系得过紧,并保持血流通畅,采血完成后弃掉前I--2mI,减少凝血活酶及破碎红细胞对血小板的影响。标本应小心混匀,室温放置,15分钟之内上机检测。如用缓冲盐溶液稀释标本,可减少血小板的聚集。
(三)血小板诱聚剂
常见的血小板诱聚剂包括:ADP、肾上腺素、胶原、凝血酶、花生四烯酸、凝血酶受体激活肽、血栓烷A2类似物。如需体外观察血小板对某种诱聚剂的反应,可在加入荧光抗体之前或同时加人待测诱聚剂,通过检测血小板活化标志、评价诱聚剂的疗效。此外,亦可测定血小板阻断剂的效果。
(二)标本制备
可选择全血、洗涤血小板及富含血小板血浆( platelet-richplasma,PRP)作为标本来源。由于洗涤血小板和PRP在制备过程中易导致血小板活化或某些亚群的丢失,所以建议选用全血,血量要求少,一般5μL即可,因而即使在新生儿疾病等标本难以获得的情况下,仍可满足检测要求。而且,全血中含有影响血小板活化的各种细胞成分,能够更加准确地反应血小板的活化状态以及血小板与其他血细胞的相互作用。
抽取静脉或动脉血,3.2%或3.8%的枸橼酸钠抗凝。亦可根据检测目的选用其他抗凝剂,如测定血小板功能,评价纤维蛋白原受体拮抗剂的疗效时宜选用胰蛋白酶、水蛭素等;而检测血小板活性时,不建议使用肝素和EDTA,因为肝素可以结合并活化血小板,EDTA会阻断纤维蛋白原与GP II b III a的结合,并解离GP II b III a复合物。
由于采血过程会引起血小板的活化,因而采血时应格外小心。压脉带不要系得过紧,并保持血流通畅,采血完成后弃掉前I--2mI,减少凝血活酶及破碎红细胞对血小板的影响。标本应小心混匀,室温放置,15分钟之内上机检测。如用缓冲盐溶液稀释标本,可减少血小板的聚集。
(三)血小板诱聚剂
常见的血小板诱聚剂包括:ADP、肾上腺素、胶原、凝血酶、花生四烯酸、凝血酶受体激活肽、血栓烷A2类似物。如需体外观察血小板对某种诱聚剂的反应,可在加入荧光抗体之前或同时加人待测诱聚剂,通过检测血小板活化标志、评价诱聚剂的疗效。此外,亦可测定血小板阻断剂的效果。
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